أوكساسيلين هو بنسلين مقاوم للبنسليناز، وطريقة عمله المضادة للبكتيريا مشابهة لطريقة البنسلين. له نشاط مضاد للجراثيم جيد ضد المكورات العنقودية المنتجة للبنسليناز، ولكن نشاطه المضاد للجراثيم ضد المكورات العقدية المختلفة والمكورات العنقودية غير المنتجة للبنسليناز هو أدنى من البنسلين ج. أوكساسيلين يمارس تأثيره المبيد للجراثيم عن طريق تثبيط تخليق جدار الخلية البكتيرية.